2.3.5-氯化三苯基四氮唑(TTC)是脂溶性光敏感復(fù)合物,常用于檢測種子的生存能力以及檢測哺乳動(dòng)物組織的缺血梗寒。它是呼吸鏈中吡啶-核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,能與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色。有活力種子胚組織活細(xì)胞中的脫氫酶可以將TTC還原成不溶性的紅色穩(wěn)定的三苯基甲臘(TTF),如果胚種死亡或胚種生活力衰退,則不能染色或染色較淺。因此可以根據(jù)胚種的染色部位和染色深淺程度來鑒定種子的生活力。
技術(shù)參數(shù)
1.取待檢腦組織樣本(一般可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦),取出后:20℃速凍20~30min,便于切片
2.將待檢腦組織切片,一般動(dòng)物樣本層厚0.5~2mm
3.切片入TTCStain(2%),避光浸染25~35min
4.切片入4%多聚甲醛或10%中性福爾馬林中固定4~24h
5.吸干組織表面清水,應(yīng)用IPP等圖像分析系統(tǒng)測量腦梗死面積并計(jì)算大腦梗死體積